熒光定量PCR概念

  熒光定量PCR（Real-Time Quantitative PCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)檢測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

SYBR Green I 熒光染料原理

在PCR反應(yīng)體系中加入過量的SYBR熒光染料，SYBR特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號(hào)，而不摻入鏈中的SYBR染料不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào)，從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加完成同步。

熒光定量PCR如何工作？

在擴(kuò)增過程中，熒光信號(hào)隨著PCR產(chǎn)物的增加而增加

---在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)

---熒光基團(tuán)在激光的作用下，產(chǎn)生波長更長的發(fā)射光

---利用熒光信號(hào)的變化動(dòng)態(tài)檢測(cè)整個(gè)反應(yīng)過程

熒光定量PCR應(yīng)用