患者源性異種移植（PDX）鼠腫瘤模型是將患者新鮮腫瘤組織移植至免疫缺陷小鼠體內而構建的活體模型，主要的優勢在于完整保留原發腫瘤的分子生物學特征、組織病理學結構及腫瘤微環境的異質性，能高度模擬人類腫瘤的生長、轉移及藥物治療的反應，已成為腫瘤基礎研究與臨床轉化的重要工具。由于其更貼近病人的腫瘤遺傳特性和異質性，PDX模型不斷受到藥企和科研院所的青睞。

一、PDX鼠腫瘤模型的標準化構建流程

PDX模型的構建需遵循嚴格的無菌操作與質量控制規范，流程包括腫瘤樣本的獲取與處理、移植宿主的選擇、異源腫瘤組織的移植操作、移植術后監測及傳代驗證五個關鍵環節。

PDX模型在構建過程中受制于異源移植物免疫反應，所以免疫缺陷動物選擇很重要，需要確保人類腫瘤組織順利生長，移植宿主的選擇需選用免疫缺陷小鼠以避免移植排斥反應。常用實驗動物品系包括：

裸鼠（先天性胸腺缺失，T細胞缺陷）；

NOD-SCID小鼠（T、B細胞雙重缺陷，無自然殺傷細胞活性）；

B-NDG小鼠（重度免疫缺陷，缺乏成熟T、B、NK細胞）

二、移植后監測與成瘤驗證

1. 常規監測：移植后每日觀察小鼠精神狀態、飲食及活動情況，測量計算腫瘤體積，繪制生長曲線。

2. 成瘤判定：腫瘤體積生長至一定體積時判定為成瘤成功。

3. 特征驗證：成瘤后通過HE染色、免疫組化（IHC）等方法，驗證移植瘤與患者原發腫瘤的組織形態、分子標志物及基因組特征一致性，確保模型有效性。

三、PDX腫瘤模型中的人源鼠源比例檢測

為維持模型穩定性，需將一代移植瘤傳代以后的模型可用于正式實驗。隨著腫瘤培養和傳代次數的增加，人源比例可能隨傳代下降，甚至出現第 3 代后幾乎無人源間質細胞，被鼠源基質取代，人源細胞比例逐漸降低，腫瘤保真度下降。人源比例的下降可能會導致失去原始腫瘤的組織架構和分化特征，基因表達譜與原始腫瘤差異增大，影響腫瘤標志物，對治療的敏感性與臨床實際不符，導致出現假陰性/陽性結果，影響藥物研發決策。

翼和生物開發的PDX模型質控檢測試劑盒PDX50采用雙色熒光探針 qPCR（FAM+HEX）檢測PDX模型總DNA中小鼠DNA的比例，并以此推導小鼠細胞浸潤比例，檢測對象為腫瘤組織DNA。試劑盒具有以下特點：

1. 穩定：全程閉管操作，無交叉污染。

2. 可靠：樣本與多個內標同板檢測，減少孔間干擾。

3. 方便：操作簡單，無需電泳步驟。

4. 定量：△CT 值，可定量檢測

PDX模型成功后需要進行PDX腫瘤模型中的人源鼠源比例檢測，對模型的質量進行評估，保重模型的成功，對后續的研究和治療提供有利的保障。