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    SPF級實驗動物大鼠小鼠病原檢測中的熒光定量PCR技術的應用

    發布時間: 2026-01-04  點擊次數: 169次

    近幾年來,PCR技術不斷發展,它以準確、快速、便捷等優點廣泛應用在科學研究的各個領域。特別是熒光定量PCR技術,高靈敏、快速、特異性高等特點。實驗大鼠小鼠在基礎生命科學和藥物學方面的應用極為廣泛,科學的發展和更新的研究目標對實驗動物的質量提出了越來越高的要求。國標GB14922—2022中明確規定了大鼠小鼠病原微生物需要排除的項目。這些病原微生物會影響到實驗動物的健康或者實驗結果。方便快捷的檢測方式有助于提高檢測的準確性和成功率。PCR技術越來越多的應用于實驗動物病原微生物的檢測。

    SPF級實驗動物根據國家標準GBGB 149222022中沙門氏菌、支原體、綠膿桿菌、肺炎克雷伯桿菌、嗜肺巴斯德桿菌等都是必檢的病原菌細菌和真菌的檢測中,傳統的細菌學培養方法需要培養基培養,富集培養、形態特征觀察、生理生化反應以及血清學鑒定等過程,操作復雜、耗時費力,對實驗人員的技術要求也很高對于病毒來說,呼腸孤病毒Reo-3、仙臺病毒SV、小鼠肝炎病毒MHV、漢坦病毒HANT都是必須要排除的病毒。ELISA是病毒檢測的好方法,但是因為抗體產生相對滯后,并且對于免疫缺陷鼠無法產生抗體,所以需要更靈敏的檢測方案。目前,越來越多的研究者使用PCR技術檢測這些病原菌和病毒

     熒光定量PCR成為用于檢測病毒感染的常用的方法。不同的熒光標記物也使得多重檢測成為可能,比如一個反應體系內可見檢測多重熒光FAM、HEX、ROX 熒光,每種熒光探針標記1-3種病毒,從而可以實現一個孔中多種病毒的檢測。

    四款聯檢試劑盒:國標病毒必檢八項、國標病毒選檢六項、國標病原菌必檢八項、國標病原菌選檢七項。聯檢試劑盒中一個熒光通道可以同時檢測 2-3 種病原體,但是不進行具體病原的鑒定,也就是說一旦某個熒光通道有信號陽性,那么該熒光對應的這 2-3 種病原體都有可能是陽性。

    翼和生物還開發了十款鑒定試劑盒。鑒定試劑盒中一個熒光通道只鑒定一種病原,所以可以通過熒光信號直接判斷感染的具體病原體。