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鼠痘病毒的熒光定量qPCR檢測方法
發布時間: 2026-02-10 點擊次數: 132次鼠痘病毒的生物學特點
鼠痘病毒,又稱小鼠脫腳病病毒,,屬于痘病毒科正痘病毒屬。感染小鼠的 DNA 病毒,感染小鼠足部、尾部腫脹潰爛、壞死脫落(故稱“脫腳病")。
鼠痘病毒(ectromelia virus,ECTV)是一類有囊膜,基因組為180~200 kb大小的線性雙股DNA病毒,是動物病毒中體積大、結構復雜的DNA病毒,病毒粒子呈卵圓形或磚形。ECTV的自然宿主為小鼠,1930年在英國的實驗小鼠種群中分離,隨后在墨西哥、日本、美國、中國均有發現。
高致死性:急性爆發時,死亡率高,尤其對封閉群小鼠是場災難。
隱蔽性:潛伏感染期間小鼠外觀健康,常規血清學檢測(如早期ELISA)可能呈陰性,卻在應激狀態下突然爆發,會嚴重干擾腫瘤、免疫、代謝等領域的研究數據可靠性。一旦污染設施,可能形成周期性爆發。
鼠痘病毒的傳統檢測方法
傳統的病毒檢測用 ELISA 的方法檢測病毒抗體,但是 ELISA 的方法容易出現假陽性,并且對于免疫缺陷小鼠來說無法產生相應的抗體,導致檢測出現假陰性。
鼠痘病毒熒光定量qPCR檢測方法
團體標準T/CALAS 44—2017《實驗動物 鼠痘病毒PCR檢測方法》標準文件中描述了鼠痘病毒的PCR檢測方法。團體標準T/CALAS 89—2020《實驗動物 鼠痘病毒環介導等溫擴增 (LAMP)檢測方法》描述了鼠痘病毒的等溫擴增 (LAMP)檢測方法,檢測的也是核酸DNA。兩個標準的出臺說明核酸檢測方法在小鼠肝炎病毒檢測領域的重要應用價值和可行性,也說明了PCR檢測方案的可行性。
翼和生物開發了針對鼠痘病毒的qPCR檢測方案,并且翼和多重熒光qPCR檢測方案可以在一個反應中檢測多個病原體。例如SPF.M/R-OVH-005試劑盒中FAM、HEX、ROX通道分別檢測鼠痘病毒Ect、小鼠腦脊髓炎病毒TMEV、多瘤病毒POLY三種病毒。翼和生物鼠痘病毒的qPCR檢測試劑盒靈敏度高、操作方便,適合進行大樣本量的快速篩查。并且翼和生物提供DNA/RNA的核酸共提取試劑盒,提取過程中加入了內參核酸基因組,用于質控整個提取和檢測過程,內參通過CY5通道進行檢測。試劑盒的靈敏度高,特異性強,便于操作。并且多重熒光定量qPCR檢測試劑盒的成本相對較低,便于開展大樣本量的篩查。
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